石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit
发布时间:2026-01-06 点击数:14
从石蜡包埋组织切片提取RNA试剂盒ISOGEN PB Kit
本产品是石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒。包含从脱石蜡,Proteinase K 处理组织到利用 ISOGEN-LS 提取RNA,非常简便、短时间(约2小时)即可完成。提取的RNA可用于RT-PCR检测。

◆特点
● 从石蜡包埋组织切片提取RNA
● 操作简便,且用时少(2小时)
● 提取的 RNA 可用于 RT-PCR
◆用途
● RT-PCR 检测 RNA 病毒
● RT-PCR 检测 mRNA
● 检测石蜡包埋组织切片的 RNA 保存度等
◆产品内容
产品 | 包装 | 备注 |
Proteinase K(20 mg/mL) | 100 µL×1 | |
Extraction Buffer | 3 mL×1 | 可室温保存 Extraction Buffer 可能出现白色结晶,非质量问题。在37~50°C条件下,孵化后,结晶完全溶解后使用。 |
ISOGEN-LS | 10 mL×1 | 非医疗用剧毒物 可冷藏保存(2~10°C) |
Ethachinmate | 60 µL×1 | 可冷藏保存(2~10°C) |
Deoxyribonuclease(RT Grade) | 20 µL×1 | |
10× DNase(RT Grade)Buffer II | 100 µL×1 | |
Stop Solution(RT Grade) | 100 µL×1 | |
DEPC treated Water | 500 µL×2 | 可室温保存 |
保存方法
冷冻保存(-20°C)
试剂盒以外必需的试剂
● Lemosol® 或Lemosol® A
● 乙醇
● 氯仿
● 异丙醇
◆使用实例
操作前需知
从石蜡包埋组织提取RNA 时, RNA 的分解持续到包埋过程,其 RNA 的完整性比从新鲜组织提取的 RNA 低。
从哺乳动物的新鲜组织提取的 total RNA 经过电泳后,检测出明亮的 28S rRNA 和 18S rRNA 条带,其比例约为 2 : 1。使用石蜡包埋组织进行提取时,无法得出这个结果。实际上,使用小鼠的石蜡包埋组织进行提取实验,几乎无法检测 28S rRNA 。因此,在包埋过程中引导RNA分解。石蜡包埋状态关系到 RNA 的分解程度。有可检测出 18S rRNA 的石蜡块,也有 18S rRNA 降解太多而无法检测出来。Nippon Gene 将判断基准设定为剩余一个 18S rRNA,in situ hybridization 等、需要高保存度RNA时,建议设定标准。
即使 RNA 已分解(包括无法确认 18S rRNA 的情况),可使用 RT-PCR 检测出基因,使用 RT-PCR 时,RNA 的完整性较好。但是使用石蜡包埋组织切片进行 PCR 时,扩增效率比一般情况的低,请注意避免引物长度设置过大(400 bp 以下,尽量设置为 200 bp以下)。
操作流程

操作实例1 从小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片提取RNA
按照操作流程,从4片10 µm小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片,提取RNA ,取1/4的 量(5 µL),使用1% 福尔马林変性Agarose S 进行电泳。

操作实例2 RT-PCR检测小鼠Gapd基因
从小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片提取500 ng RNA, DNase 处理后,进行RT-PCR,检测出小鼠glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(Gapd)基因外显子5(258 bp)。


关于微量样本RT-PCR
对于无法得到提取RNA的电泳结果或10 ng 以下的情况,建议添加RT反应補助试剂RTmate,进行逆转录。
◆备注
● 本产品为实验研究用试剂。请勿用于医疗用途。
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
| 315-06421 | ISOGEN PB Kit ISOGEN石蜡组织切片RNA提取试剂盒 | 20次用量 |
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