ISOSPIN Plant RNA 从植物组织提取RNA试剂盒

从植物组织提取RNA试剂盒

ISOSPIN Plant RNA

ISOSPIN Plant RNA用于从植物组织提取和纯化RNA。本产品的原理是在离液剂离子条件下，RNA吸附于二氧化硅。无需苯酚和氯仿等有毒有机溶剂。所使用的离心柱最大限度地确保了柱容积，内封的硅胶模确保足够的RNA吸附容量和高洗脱率。

本试剂盒采用离心法去除杂物，在硅胶模上进行 DNase I 处理，提取和纯化高纯度RNA用时仅约１小时。

◆特点

•　高纯度 RNA

离心法去除杂物和硅基质膜上的 DNase I 处理能提取出高纯度RNA。

•　无需使用过滤器

无需使用过滤器样品均匀化或过滤时后。本试剂盒用离心法去除杂物沉淀。

•　无需苯酚、氯仿

无需使用苯酚、氯仿等有毒有机溶剂。

•　包装附有 DNase I

试剂盒内含有 DNase I （RNase free），不需另外购买。

◆产品列表

ISOSPIN Plant RNA (50次用量)
产品	容量	保存	备注
PT Extraction Buffer	30 mL x 1支	室温
PT Binding Buffer	40 mL x 1支	室温	含乙醇
PT Wash1 Buffer	40 mL x 1支	室温	含乙醇（清洗液）
PT Wash2 Buffer	40 mL x 1支	室温	含乙醇（清洗液）
DNase I (RNase free)	2,000 units x 1支	-20°C
10× DNase I Buffer	1 mL x 1支	-20°C
ddWater (RNase free)	1 mL x 8支	室温	调制DNase I 溶液?洗提
离心柱	50 支 x 1袋	冷藏	上端组成：吸附柱下端组成：收集管

运送方法

NIPPON GENE提供直送服务，将室温品和冷藏品的试剂盒、－20°C的产品、放入干冰的泡沫箱一同放入纸箱，在常温下进行运输。

◆使用实例

Data.1　RNA的回收量标准

本产品可提取的RNA的回收量标准如下表。

样品

菠菜（叶）	0.5 μg RNA/mg 组织
青花菜（芽）	1.0 μg RNA/mg组织
卷心菜（种子）	1.3 μg RNA/mg组织
卷心菜（芽）	1.4 μg RNA/mg组织
卷心菜（叶）	0.1 μg RNA/mg组织
竹子（叶）	0.3 μg RNA/mg组织
郁金香（球根）	0.2 μg RNA/mg组织

Data.2　从卷心菜（十字花科）种子及从叶子提取RNA

使用ISOSPIN Plant RNA与其他公司产品按照步骤提取卷心菜的种子（约 4 mg）和叶（约 30 mg）的RNA。用吸收光谱和凝胶电泳对提取出的RNA进行比较。以提取出的总RNA为模板逆进行转录，使用GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX对获得的cDNA进行实时qPCR。

实验条件

1. 样品量

·种子（约4 mg）

·叶（约30 mg）

2. 变性凝胶电泳

·凝胶：1% Agarose S（甲醛变性）

·RNA添加量：种子（1 μg）/叶（0.5 μg）

·RNA Ladder：与RNA添加量等量

3. 实时qPCR

·试剂：GeneAce SYBRR qPCR Mix α Low ROX

·装置：ABI 7500 Fast

·模板cDNA：以提取出的总RNA为模板进行逆转录

·扩增片段长度：441 bp

·实验次数： n=3

结果

从吸收光谱结果看，在A230峰值上ISOSPIN Plant RNA比A公司低，说明本产品更能有效去除多糖类杂物（图1）。

卷心菜种子	卷心菜叶

图1 吸收光谱

		【RNA添加量】种子（1 μg）／叶子（0.5 μg）【Marker】 RNA Ladder(与RNA的添加量等量) 1% Agarose S（甲醛变性）
图2 变性凝胶电泳