Phos-tag(TM) Agarose 亲和层析纯化磷酸化蛋白

发布时间：2025-04-28 点击数：6

Phos-tag™ Agarose

亲和层析纯化磷酸化蛋白

填入色谱柱中使用。可分离、纯化、浓缩磷酸化蛋白。不使用界面活性剂、还原剂，可得到状态近似生物体内的磷酸化蛋白。

◆原理

◆优点、特色

●　无需使用还原剂或表面活性剂即可纯化

●　与亲和层析方法类似。

●　可在１小时内纯化磷酸化蛋白。

●　Phos-tag™ Agarose 捕获结合到 Tyr、Thr、Ser、Asp、His 等氨基酸、糖类、脂类上的无机磷酸根和大量二价磷酸根。

●　可在生理条件下（pH7.5）捕捉蛋白。

●　纯化后的产物可用于 Co-IP 实验和其他蛋白活性实验。

◆案例、应用：

【使用例子：A431 裂解液中的磷酸化蛋白的纯化】

把Phos-tag™ 填充到柱里，再加上 A431 裂解液。

SYPRO Ruby 染色（左图）再使用 Anti-p Tyr 抗体进行免疫印迹（右图），检测出结果。

结果确认磷酸化蛋白浓缩在柱吸附层里。

M：分子量标记

Lane 1：未吸附层

Lane 2：吸附层

Lane 3：柱清洗层

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