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LabAssay(TM) 游离脂肪酸检测试剂盒 LabAssay(TM) NEFA

发布时间:2024-09-27 点击数:20
LabAssay NEFA
LabAssay 游离脂肪酸检测试剂盒
在血液中NEFA(Non-esterified Fatty Acid:游离脂肪酸)与白蛋白结合,被转运至外周组织,成为外周组织重要的能源来源。游离脂肪酸的浓度通过脂肪组织释放、外周组织消耗以及肝脏摄取进行调节。
本产品采用了基于酰基辅酶A合成酶(ACS)、酰基辅酶A氧化酶(ACOD)和3-甲基-N-乙基-N-(β-羟乙基)-苯胺(MEHA)的蓝紫色显色酶法。不可用于体外诊断。
◆检测原理
样品中的游离脂肪酸(NEFA)在酰基辅酶A(Acyl-CoA)和腺苷- 5'-三磷酸二钠(ATP)存在下,通过酰基辅酶A合成酶(ACS)的作用,生成酰基辅酶A、AMP以及焦磷酸(PPi)。生成的酰基辅酶A在酰基辅酶A氧化酶(ACOD)的作用下被氧化,同时生成2,3-反式烯酰辅酶A(2,3-trans-Enoyl-CoA)和过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶(POD)的作用下,与3-甲基-N-乙基-N-(β-羟乙基)-苯胺(MEHA)和4-氨基安替比林(4-Aminoantipyrine)进行定量氧化缩合,生成蓝紫色色素。通过测定这种蓝紫色的吸光度,即可计算样品中的NEFA浓度。
04093472_img01.png
◆性能
● 标准曲线范围:0.4~1.97 mEq/L
● 检测时间:约 20 min
       ● 样品:血清、血浆(小鼠、大鼠、人、犬、猫)
       ● 所需样品量:4  μL
       ● 测定波长:550 nm
◆试剂盒组成
1.显色剂A—10 mL用×4瓶
2.显色剂A溶解液—45 mL×1瓶
3.显色剂B—20 mL用×4瓶
4.显色剂B溶解液—90 mL×1瓶
5.标准溶液(油酸1 mEq/L)—7 mL×1瓶
  ※ 油酸1 mEq/L=1 mmol
◆标准曲线示例
04093472_img01.png
◆检测操作方法
微孔板法
按下表条件进行反应。
No.
标准溶液蒸馏水或去离子水样品量浓度
180 μL120  μL4  μL0.40 mEq/L
2120 μL80  μL4  μL0.60 mEq/L
3160 μL40  μL4  μL0.80 mEq/L
4未经稀释-4  μL1.00 mEq/L
5未经稀释-8  μL1.97 mEq/L*1
*1:样品量通常是4  μL, 但在这里使用了8  μL。NEFA的浓度需要根据上表校正。

           
Test
标准
空白对照
样品盲检*2
显色试剂 A
80  μL
80  μL
80  μL
80  μL
待测物
血清 4  μL
标准溶液 4  μL
蒸馏水或去离子水 4 μL
充分混合*3、37 ℃加热10 min。
显色试剂 B
160  μL
160  μL
160  μL
160  μL
待测物
血清 4  μL
充分混合*3、37 ℃加热10 min。
恢复至室温,在30 min内以空白作为对照,测定样品和标准溶液的吸光度。
550 nm 吸光过滤
*2:普通的样品无需样品盲检。请使用乳糜血清或溶血血清进行测试。
*3:使用板式搅拌机,在600~1000 rpm下搅拌1 min左右。
◆加标回收测试
NEFA的加标回收测试,将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中,n=2。
人样品
人样品
添加量(mEq/L)
测定值(mEq/L)
回收量(mEq/L)
回收率(%)
血清样品
-
0.69
  
0.4
1.14
0.45
111.80%
0.61
1.34
0.64
105.70%
0.78
1.54
0.85
108.50%
1.01
1.73
1.03
102.30%
血浆(EDTA)
样品
-
0.28
  
0.4
0.7
0.43
105.30%
0.61
0.9
0.62
102.50%
0.78
1.12
0.84
106.80%
1.01
1.34
1.06
105.40%
小鼠样品
小鼠样品
添加量(mEq/L)
测定值(mEq/L)
回收量(mEq/L)
回收率(%)
血清样品
-
0.7
  
0.4
1.07
0.37
91.70%
0.61
1.31
0.61
100.10%
0.78
1.44
0.74
94.50%
1.01
1.62
0.92
91.30%
血浆(EDTA)
样品
-
0.62
  
0.4
0.99
0.37
92.50%
0.61
1.29
0.68
111.50%
0.78
1.38
0.77
97.80%
1.01
1.62
1
99.10%
大鼠样品
大鼠样品
添加量(mEq/L)
测定值(mEq/L)
回收量(mEq/L)
回收率(%)
大鼠血清样品
-
0.57
  
0.4
1
0.43
106.40%
0.61
1.21
0.65
106.20%
0.78
1.4
0.83
106.40%
1.01
1.57
1.01
99.70%
大鼠血浆
(EDTA)样品
-
0.41
  
0.4
0.86
0.45
111.50%
0.61
1.07
0.66
108.50%
0.78
1.27
0.86
109.50%
1.01
1.44
1.02
101.40%
培养基样品
样品
添加量(mEq/L)
测定值(mEq/L)
回收量(mEq/L)
回收率(%)
50%培养基
+标准品
-
0.03
-
-
0.374
0.409
0.38
101.60%
0.683
0.71
0.68
99.60%
0.829
0.812
0.782
94.40%
1.013
1.059
1.03
101.70%
◆样品检测示例
人血清样品
 
测定值(mEq/L)
mean
SD
CV(%)
混合人血清,男性
0.686
0.688
0.687
0.001
0.2
混合人血浆
(K2EDTA),男性
0.354
0.35
※0.352
0.003
0.8
※参考值
20%稀释CD-1(ICR)雄性小鼠正常血清
序号
测定值(mEq/L)
Mean(mEq/L)
SD
CV(%)
1
1.119
1.117
1.118
0.001
0.1
2
0.783
0.793
0.788
0.007
0.9
3
0.7
0.731
0.715
0.022
3.1
4
0.795
0.792
0.794
0.002
0.2
5
0.825
0.833
0.829
0.005
0.6
100%CD-1(ICR)雄性小鼠正常血浆(K2EDTA)
序号
测定值(mEq/L)
Mean(mEq/L)
SD
CV(%)
1
0.311
0.308
※0.309
0.002
0.6
2
0.319
0.321
※0.320
0.002
0.6
3
0.202
0.208
※0.205
0.004
2
4
0.173
0.185
※0.179
0.008
4.6
5
0.293
0.318
※0.305
0.017
5.6
※参考值
10%稀释雄性Sprague Dawley大鼠正常血清
序号
测定值(mEq/L)
Mean(mEq/L)
SD
CV(%)
1
0.3
0.3
※0.300
0
0
2
0.373
0.368
※0.371
0.004
1.1
3
0.301
0.277
※0.289
0.017
5.8
4
0.365
0.364
※0.365
0
0.1
5
0.403
0.362
※0.382
0.029
7.6
※参考值
100%雄性比格犬正常血清
序号
测定值(mEq/L)
Mean(mEq/L)
SD
CV(%)
年龄
1
0.654
0.657
0.656
0.0027
0.4
4
2
0.642
0.688
0.665
0.032
4.8
6
3
0.419
0.431
0.425
0.009
2
6
4
0.377
0.383
※0.38
0.0057
1.5
11
5
0.887
0.877
0.882
0.007
0.8
12
6
0.604
0.595
0.599
0.006
1.1
6
7
0.987
1.025
1.006
0.0267
2.7
10
8
0.501
0.51
0.506
0.006
1.2
4
※参考值
100%雄性比格犬正常血浆(EDTA)
序号
测定值(mEq/L)
Mean(mEq/L)
SD
CV(%)
年龄
1
0.44
0.444
0.442
0.0033
0.7
4
2
0.419
0.435
0.427
0.011
2.6
6
3
0.311
0.306
※0.308
0.0037
1.2
10
4
0.47
0.487
0.478
0.0123
2.6
12
5
0.472
0.475
0.473
0.005
1
6
6
0.37
0.364
※0.367
0.0047
1.2
11
7
0.789
0.77
0.78
0.0133
1.7
10
8
0.439
0.384
0.411
0.0387
9.4
12
※参考值
100% 雄性短毛猫正常血清
序号
测定值(mEq/L)
Mean(mEq/L)
SD
CV(%)
年龄
1
0.709
0.726
0.717
0.0117
1.6
3
2
0.628
0.642
0.635
0.01
1.6
3
3
1.004
1.003
1.004
0.0053
0.5
6
4
0.974
0.987
0.981
0.0093
0.9
4
5
0.624
0.649
0.636
0.017
2.7
6
6
1.175
1.212
1.193
0.0267
2.3
6
7
1.086
0.959
1.022
0.0893
8.8
1
8
0.371
0.393
※0.382
0.0157
4.1
1
※参考值
100%雄性短毛猫正常血浆(EDTA)
序号
测定值(mEq/L)
Mean(mEq/L)
SD
CV(%)
年龄
1
1.092
1.107
1.099
0.0103
0.9
0.5
2
0.177
0.172
※0.174
0.0033
2
1
3
0.243
0.24
※0.241
0.0043
1.7
3
4
0.32
0.319
※0.320
0.0067
2.2
0.5
5
0.363
0.354
※0.359
0.006
1.7
3
6
0.206
0.189
※0.197
0.012
6.2
3
7
0.232
0.199
※0.215
0.024
11.1
0.5
8
0.142
0.12
※0.131
0.016
12.3
1
※参考值
◆稀释线性度测试
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0816467119078639.jpg
产品列表
产品编号产品名称规格产品等级
633-52001
LabAssay™ NEFA
LabAssay™ 游离脂肪酸检测试剂盒
500 tests
-
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

 

公众号

400-021-8151